技術文章
TECHNICAL ARTICLESFastDigest 緩沖液可在 4 攝氏度下儲存至少 6 個月。為了長期儲存直至過期,我們建議將 FastDigest 和 FastDigest 綠色緩沖液儲存在 -20 攝氏度。
我們的一般建議是在 500 μL 中使用 5-10 μL 含有 100 μg DNA 的 FastDigest 酶,在 1 mL 中使用含有 100 μg DNA 的 10-20 μL FastDigest 酶。在推薦溫度下將反應孵育16小時(如果特定酶容易產生星形活性,則為最長推薦的孵育時間)。最佳條件可能會有所不同,因為 DNA 的消化取決于特定 FastDigest 限制性內切酶和 DNA 底物的性質。
FastDigest 酶的濃度是專有信息。FastDigest 酶活性通過 FastDigest 單元 (FDU) 測量:1 μL 酶 (1 FDU) 在 20 μL 1X FastDigest 緩沖液中在 37 攝氏度下 5-15 分鐘內裂解 1 μg DNA 底物。
是的,FastDigest 緩沖液(Cat.不。B64)和 FastDigest 綠色緩沖液(Cat.不。B71)可以單獨購買。
FastDigest 綠色緩沖液具有與無色 FastDigest 緩沖液相同的性能,但可以將反應混合物直接上樣到凝膠上。10X FastDigest 綠色緩沖液包括一種密度試劑和兩種用于直接上樣的示蹤染料。藍色染料在 1% 瓊脂糖凝膠中與 3-5 kb DNA 片段一起遷移,激發峰為 424 nm。黃色染料在 1% 瓊脂糖凝膠中的遷移速度比 10 bp DNA 片段快,激發峰為 615 nm。