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?酶學分類?
?類型?:II 型限制性內切酶,屬于 ?MunI 同裂酶?(識別相同序列但來源不同)12。
?識別序列?:5'-C↓AATTG-3'(↓為切割位點),切割后產生 ?5' 突出黏性末端?12。
?活性參數?
?濃度?:5 U/µL(1 單位定義為 37℃ 下 1 小時內消化 1 µg λDNA 的酶量)12。
?最適條件?:37℃、FastDigest 通用緩沖液(5-15 分鐘完成切割)12。
?快速酶切?
使用 ?FastDigest 技術?,可在 ?5-15 分鐘內? 完成切割,顯著縮短實驗時間26。
?通用緩沖液兼容性?
所有 FastDigest 酶共享統一緩沖液,支持 ?多酶切反應?(如與 EcoRI 聯用)26。
?高純度?
無核酸酶污染,酶切產物可直接用于下游實驗(如連接、電泳)26。
?分子克隆?
用于載體構建、外源基因插入等,其黏性末端便于連接反應26。
?基因分型?
通過酶切位點差異分析 DNA 多態性(如 SNP 檢測)26。
?基因組圖譜構建?
切割大片段 DNA 為小片段,用于物理圖譜繪制26。
?反應體系?
?推薦緩沖液?:FastDigest 通用緩沖液(無需額外優化)26。
?反應時間?:5-15 分鐘(37℃)26。
?熱滅活?
65℃ 孵育 5 分鐘可失活26。
?儲存條件?:-20℃ 避光保存,避免反復凍融26。
?甲基化敏感性?:部分同裂酶(如 MunI)可能受甲基化影響,需驗證